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简述猪瘟检测中窗口期的确认方法
猪瘟病毒的附着力到底有多强?直接接触或者携带病毒的物品再次传播的能力有多强?尚不清晰。目前已知猪瘟是高度接触性传播的急性,主要通过接触或采食受猪瘟病毒污染的物品,以及通过昆虫吸血而传染。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。今天我们主要介绍猪瘟检测中窗口期的确认方法。
确认猪只是否处于窗口期的方法很多,但当前成熟的方法还是定性或定量的聚合酶链式反应(PCR)法。
检测样本的选择 根据研究数据,口拭子、鼻拭子都可以作为窗口期的检测样本,但是新鲜分泌的唾液往往具有较大的检测优点,其病毒含量远远高于口拭子和鼻拭子。新鲜分泌的唾液中非洲猪瘟病毒值比口鼻拭子中的非洲猪瘟值平均低5左右。
唾液样本处理 处于窗口期的猪只,尚具备较强的特异性免疫能力和非特异性免疫能力,机体对病毒的清理作用较强,两者处于对抗状态,主要是唾液中的酶(溶菌酶、核酸酶、碱性磷酸酶等)活性较高,收集到唾液中的非洲猪瘟病毒如果含量过低,病毒很快将被唾液降解。因此,采集的唾液要进行核酸保护。
唾液样本检测 由于处于窗口期内唾液样本中非洲猪瘟病毒含量较低,对检测条件的要求较为苛刻。建议对检测环境(温度、空气、水、操作台面)、检测试剂套装、检测仪器进行比对和考核,慎重选择。为了取得好的唾液样本,采样之前需要对动物进行禁食处理(12小时)。
研究证实,试管唾液中的病毒在静置或离心状态下,底部的非洲猪瘟病毒含量远远高于试管上清中的病毒含量,所以建议从试管底部取样进行检测。
实施实验室检测工作之前,建议对操作人员进行科学采样和取样培训,培训合格后才允许从事检测工作。
确认猪只是否处于窗口期的方法很多,但当前成熟的方法还是定性或定量的聚合酶链式反应(PCR)法。
检测样本的选择 根据研究数据,口拭子、鼻拭子都可以作为窗口期的检测样本,但是新鲜分泌的唾液往往具有较大的检测优点,其病毒含量远远高于口拭子和鼻拭子。新鲜分泌的唾液中非洲猪瘟病毒值比口鼻拭子中的非洲猪瘟值平均低5左右。
唾液样本处理 处于窗口期的猪只,尚具备较强的特异性免疫能力和非特异性免疫能力,机体对病毒的清理作用较强,两者处于对抗状态,主要是唾液中的酶(溶菌酶、核酸酶、碱性磷酸酶等)活性较高,收集到唾液中的非洲猪瘟病毒如果含量过低,病毒很快将被唾液降解。因此,采集的唾液要进行核酸保护。
唾液样本检测 由于处于窗口期内唾液样本中非洲猪瘟病毒含量较低,对检测条件的要求较为苛刻。建议对检测环境(温度、空气、水、操作台面)、检测试剂套装、检测仪器进行比对和考核,慎重选择。为了取得好的唾液样本,采样之前需要对动物进行禁食处理(12小时)。
研究证实,试管唾液中的病毒在静置或离心状态下,底部的非洲猪瘟病毒含量远远高于试管上清中的病毒含量,所以建议从试管底部取样进行检测。
实施实验室检测工作之前,建议对操作人员进行科学采样和取样培训,培训合格后才允许从事检测工作。